返回首页  
学科简介 优势特色 教学力量 教学条件 课程设置 科研动态 研究方向 科研资源 学科成果 学习工具
特色医疗
经典病例
疾病知识
门诊时间
健康教育
就医指南
血液病常识
继续教育
影响急性白血病预后的不利因素有哪些?...
白血病的治疗分哪几个阶段?各阶段的目...
怎样才算白血病完全缓解?
白血病持续完全缓解是否可算白血病临床...

Content on this page requires a newer version of Adobe Flash Player.

Get Adobe Flash player

特色医疗
恶性血液病的现代实验诊断

    恶性血液病的现代诊断技术已由二十世纪初中期单一的骨髓细胞形态学检查和骨髓活检病理检查发展为由骨髓细胞形态学、免疫学、遗传学和分子生物学以及骨髓病理学,甚至病原学组成的多学科元素综合诊断系统,白血病等恶性血液病的诊断水平大大提高,为白血病的个体化治疗提供了细微准确的病理诊断依据。世界卫生组织(WHO)对白血病的诊断提出了MICM分型,即白血病的确诊应具有骨髓细胞形态学、免疫学、遗传学和分子生物学方面的实验依据。诸多诊断数据相互补充、相互印证,提高了白血病的诊断准确率,为白血病的治疗策略、疗效评估以及复发预防提供了及时有效的病理依据。

血液病实验室新技术

(1)流式细胞术(FCM)  采用流式细胞仪对标记有荧光抗体的白血病细胞进行分类检测,经数据及图像分析,判断白血病细胞的免疫特性。目前采用流式细胞术可以区分不同来源的白血病细胞,如B细胞、T细胞及髓细胞系等,做出对白血病的免疫分型,为病人的靶向治疗及个体化治疗提供实验室依据。我科目前开展的新技术有:

检测项目

项目内涵

临床意义

急性白血病免疫分型全套

CD45设门;髓系及T、B细胞系若干抗体检测。

鉴别T、B及髓系白血病及混合细胞白血病;对分化程度极低微的白血病有极高的参考价值。

淋巴瘤免疫分型全套

CD45或CD19设门;T、B及浆细胞等细胞系若干抗体检测。

对ALL、CLL及LMCL诊断有辅助参考价值;协助诊断MM、MCL及FL等。

T细胞亚群

检测CD3/CD4/CD8 CD19/CD16+CD56

对各种免疫性疾病有辅助诊断意义;可作为白血病化疗及造血干细胞移植免疫恢复监测指标。

CD55/CD59检测

检测红细胞或白细胞CD55/CD59抗体表达

对PNH及各种贫血等有辅助鉴别诊断意义。

造血干细胞计数

检测CD34+细胞

对干细胞动员、采集、冻存效果等有临床指导意义。

骨髓微小残留病检测

4组标记抗体检测白血病特异表达抗原。

对白血病化疗和干细胞移植的疗效观察和复发预防有临床参考价值。

脑脊液微小残留病检测

2组标记抗体检测白血病特异表达抗原。

观察白血病中枢神经系统侵犯和复发预防。

网织红、网织血小板检测

检测外周血中新生红细胞及血小板。

观察各种溶血及血小板减少疾病,骨髓储备及释放功能;白血病化疗及干细胞移植造血恢复监测。

(2)荧光原位杂交技术(FISH)  应用特定的RNA探针对血液肿瘤突变基因进行杂交,检测放大的荧光信号,判断分析病变基因。目前常用的探针有序列探针、着丝粒探针等;对基因探针荧光信号的观察,可以检测白血病细胞是否出现融合基因和断裂基因等改变,从而判断患者的白血病细胞是否有特定基因的改变。我科目前开展的新技术有:

疾病

探针

意义

慢性粒细胞白血病(CML)

BCR/ABL

t(9;22)可见于95%的CML患者,阳性可辅助诊断,并可用格列卫进行治疗

ASS

ASS(9q34)见于30%CML患者,ASS基因缺失患者对化疗药物的反应较差,慢性期易急变

P53

位于17q上P53缺失,在慢性粒细胞白血病患者中频繁出现,并且是慢性粒细胞白血病中排在第二位的染色体异常,在10%的病例单独出现或者伴随另外的染色体异常,p53缺失与慢性粒细胞白血病高比率的急性变为急性髓细胞白血病(AML)相关。

骨髓增殖性瘤(cMPN)

BCR/ABL

t(9;22)可见于95%的CML患者,阳性可辅助诊断,并可用伊马替尼进行治疗。有助于cMPN的诊断、分型、治疗方案的制定。

JAK2

对PV、ET及PMF有辅助诊断意义。如JAK2基因阳性,可用JAK2抑制剂治疗。

急性淋巴细胞白血病(ALL)

BCR/ABL

BCR/ABL阳性患者成人ALL预后差,伊马替尼治疗有效。

TEL/AML1

TEL/AML1探针检测染色体t(12;21)(p12;q22)易位,在15-35%的儿童B细胞ALL中可见,也是该型白血病中最常见的易位,在成人罕见,主要为儿童,检测到TEL/AML1预示预后良好。

E2A

在儿童B细胞ALL中涉及到E2A基因易位已经被接受为非随机的染色体易位。目前发现有两个基因PBX1(位于1号染色体)和HLF(位于17号染色体)可与E2A基因融合,导致t(1;19) 和 t(17;19)易位,形成E2A/PBX1 和 E2A/HLF 融合基因,前者更常见,存在于大约5%的儿童ALL,后者仅存在于1%的儿童ALL,两个融合基因都与预后不良相关,而且t(1;19)易位患者有更高的复发率。

急性髓细胞白血病(AML)

PML/RARa

t(15;17)是M3患者的主要遗传学标志,阳性可确诊AML-M3型诊断。

AML1/ETO

t(8;21)融合基因可见于92%的M2型AML患者中,特别是和我国首先提出的AML-M2b型密切相关

MYH11

CBFβ/MYH11

MYH11 及CBFβ/MYH11探针针对Inv(16)(p13q22) 和 t(16;16)(p13;q22),在10%新发生的AML患者可见,最常见于M4型,约占20%患者,治疗有很高的完全缓解率,在新发的成人AML中作为很好的预后因子,比大多数的其他AML预后更好,中位生存时间为5年。

MLL

MLL基因位于11q23,MLL的易位重排涉及到至少10%的各种类型急性白血病,包括ALL,AML,治疗相关性白血病等。主要见于ALL中,MLL基因易位重排的检测通常与预后较差相关。

慢性淋巴细胞白血病(CLL)

CSP 12/D13S25

GLP ATM

GLP RB1

GLP P53

预后差:P53缺失(32个月)

预后中等:ATM缺失(79个月)

CSP 12三体(114个月)

预后较好:RB1缺失(133个月)

D13S25缺失(133个月)

骨髓异常增生综合症(MDS)

1、5、7、8、20、及xy染色体相关基因

预后差:复杂异常或累及7号染色体异常

预后中等:其余异常

预后较好:正常核型、5q-、20q-、-Y单独存在

多发性骨髓瘤(MM)

GLP RB1

GLP P53

GLP D13S319

GLP IGH

GLP 1q21

预后差:P53缺失(24.7个月),1q21 扩增,IGH发生t(4;14) t(14;16)易位

预后中等:RB1缺失(42.3个月),D13S319缺失(42.3个月)

预后较好:IGH发生t(11;14)易位或者无其他遗传改变

淋巴瘤(ML)

IGH

检测IGH(14q32)基因克隆性重排可以鉴别B细胞恶性淋巴瘤和淋巴组织良性增生性病变。

IGH/CCND1

t(11;14)融合基因可见于95%的套细胞淋巴瘤,是套细胞淋巴瘤与其他淋巴瘤鉴别的重要指标。

IGH/BCL2

t(14;18)重排发生在约80%-85%的滤泡性淋巴瘤(FL)患者中,检测IGH/BCL2基因重排可以辅助诊断FL。

BCL6

至少40%的DLBCL(弥漫性大B细胞淋巴瘤)涉及3q27(BCL6)染色体易位或者BCL6基因重排。

C-MYC

染色体易位导致C-MYC(8q24)基因断裂重组是伯基特淋巴瘤的一个标志,可以用于临床上伯基特淋巴瘤的辅助诊断.

MALT1

MALT1(18q21)基因断裂重组可见于约10%-20%的MALT淋巴瘤(粘膜相关淋巴组织淋巴瘤),有利于辅助诊断。

注:临床医师可根据疾病诊断的需要选择FISH探针,也可以参考使用实验室技师推荐探针。

(3)染色体核型分析  目前有G、Q、R带等检测方法;主要检测骨髓或外周血的染色体结构改变和数目改变。对各类急慢性白血病提供遗传学分型定性诊断;对骨髓异常增生综合症及淋巴瘤等提供遗传学辅助诊断。我科目前开展的新技术有:

检测项目

项目内涵

临床意义

染色体核型分析(骨髓)

R带;骨髓染色体结构改变和数目改变。

对CML、AML-M3和AML-M2b提供遗传学分型定性诊断。对MDS及淋巴瘤等提供遗传学辅助诊断。为AL及淋巴瘤分层治疗提供依据。

染色体核型分析(血液)

R带;血液染色体结构改变和数目改变。

检测CMLCLL等外周血白血病细胞增高的病例;遗传性疾病的初筛检测。

(4)多聚酶链反应(PCR)  运用探针与白血病突变基因配对的原理,通过多聚酶链反应来扩增基因片段,从而应用定性或定量的方法来检测患者细胞是否有异常基因的改变。目前,在急性白血病突变基因的检测方面应用十分广泛。

(5)骨髓病理活检  目前主要有塑料包埋和石蜡包埋法。主要检查骨髓组织的病理改变,对骨髓异常增生综合症、再生障碍性贫血、骨髓纤维化、白血病及骨髓增殖性瘤提供病理诊断依据。

(6)骨髓细胞形态学检查  是传统的血液病诊断技术,简便快捷、行之有效。对各种急慢性白血病的定性及形态学分型诊断;淋巴瘤及实体瘤骨髓侵犯、再生障碍性贫血、骨髓异常增生综合症、各种贫血等疾病的诊断及鉴别诊断有很高参考价值。

(7)CD34分选术  采用磁珠分选仪,对病人的外周血进行CD34+细胞分选,具有剔除其他免疫细胞和肿瘤细胞的作用,是治疗多种难治性免疫性疾病最先进的方法。

项目

项目内涵

临床意义

CD34阳性细胞分选术

采用德国clinMACS细胞分选仪。磁珠分选。

CD34阳性细胞分选术是CD34阳性细胞干细胞移植的基础技术环节。该移植术是治疗难治性免疫性疾病如ITP、克隆氏病、白塞氏病、小柳原田综合症、系统性红斑狼疮等、神经内分泌癌以及有骨髓侵犯的淋巴瘤和实体瘤等诸多疾病的最为先进的方法。

(8)干细胞冻存  采用低温技术对干细胞液进行保存,是自体干细胞移植不可缺少的技术手段。

3. 血液系统相关疾病的实验诊断策略

1.  及早全面诊断血液肿瘤的办法:

骨髓活检、骨髓及血液涂片套餐检查+FCM、FISH

2.  骨髓穿刺干抽:骨髓活检+组织块印片

——适用于MF、MDS及转移癌的确诊

3.  大量胸腹水,:细胞学涂片检测+流式细胞术

——疑诊淋巴瘤

4.  脑脊液异常:细胞学涂片检测+流式细胞术

——鉴别AL、淋巴瘤及实体瘤中枢神经系统侵犯

5.  淋巴结肿大:淋巴结印片/穿刺涂片+FISH检测

——疑诊淋巴瘤

6.  罕见及复杂染色体变异:染色体核型分析+中期FISH

——需要确定的特殊遗传学变异
 
学科简介 | 优势特色 | 教学力量 | 教学条件 | 课程设置 | 科研动态 | 研究方向 | 科研资源 | 学科成果 | 学习工具
第三军医大学新桥医院血液科 联系电话: 774409
COPYRIGHT @ All Right Reserved XINQIAO hospital.